如何 🌺 溶 🍀 解生长因子
所需材料:生长 💮 因子冻干粉
无 🐘 菌蒸馏 🦊 水或生理盐水
无 🌷 菌注射器(体积根 🦟 据生长因子量而定)
无菌针头1. 计算用水 🌴 量 🐛 :
一般来说,每 1 毫 1 克 🕸 生长因子需要毫升无菌蒸馏水或 🐴 生 🐟 理盐水。
2. 回溶 🌹 生长 🦈 因 🌷 子:
将 🦍 无菌注射器吸取 🌼 计算得出的无 🌻 菌水量。
将注射器针头刺入 🌿 生长因子冻干粉瓶中 🌼 ,缓慢将无菌水注射到冻干粉上。
轻轻摇晃瓶子,直到冻干粉完全溶解 🕷 。
切 🌻 勿过度摇晃,以免产 🐛 生气泡。
3. 更 🌼 换针头:
一旦生长因子溶解 🕸 ,更换注射器针头为无菌 🌺 未用针头。
4. 保存溶解的 🐴 生长 🐛 因子:
溶解的生长因子应存放在 🕊 无菌环 🐦 境中,避光保 🦢 存。
未经 💮 稀 🌴 释的生长 🌷 因子可以冷冻保存长达几周。
稀释的生长 🐋 因子 🌼 应立即使用或在短期内冷藏保存。
提示:使用高质量的 🐬 生长因子 🐛 冻 🦆 干粉。
保 🌲 持 🌿 无菌状态至关重要,以防止污染。
溶解生长因子 🌻 后,应立即使用或保存。
按照制造商 🐡 的说明进行操作。
注意:始终按照研究协议 🦄 或合格医疗专业人员的指示使用生长因子 🌺 。
生长因子 🐧 是 🐝 强大的蛋 🌴 白质因,此在操作时应小心谨慎。
溶解生长因子的 🐎 最佳溶解方 🐅 法
材料:冻 🐘 干 🐼 生长因子
无血 🐬 清培养基 🐶 或适当 🕊 的缓冲液
移液枪和 🦆 吸头
涡旋振荡器或 🐧 振荡 🦄 器 🐅
孵育 🐺 器 🐅 (可选)
步骤:1. 重 🦋 构 🐕 生长因 🌼 子:
根据制造商的 🦁 说明,使用无 🦉 血清培养基或适当的缓冲液重构冻干生长因子。
小心加入液体,避免 🐋 产生 🐈 气泡 🐠 。
2. 涡 🕷 旋 💐 :
将 🌹 溶液轻轻涡旋,直到生长因子 🐼 完全溶解。
3. 孵育 ☘ (可 🌷 选 🐠 ):
如果制造商 🐺 说明中有要求,将溶解的生长因子在 4°C 孵,育过夜或更长时间以确保 🦢 完全溶解。
4. 过 🐼 滤(可 🐦 选):
如果需要消除不溶性颗粒 🐈 ,可以通 🐦 过 0.22 微米的过滤器过滤溶解液。
注意事项:使 🦆 用 🐕 无菌技术,以 🍀 防止污染。
避免过 🪴 度涡旋 🌷 ,因为它会 🌷 使生长因子变性。
严 🌺 格按照制造 🐒 商的说明进行重 🌿 构和溶解。
某些生 🌼 长因子对温度敏感因,此在溶解和储存 🐶 过程中保持适当温度很重要。
溶解的生长因 🐵 子应尽快使 🐡 用或储存。
储存条件取决于特 🦟 定的生长 🌵 因子 🕷 。
通常情况下,生长因子不能被溶解酶溶 🐬 解。
溶解酶是一类酶 🐺 ,专,门分解多糖如糖蛋白糖 🐋 、脂和多糖。而,生。长因子通常是蛋 🐈 白质它们不含有可被溶解酶分解的多糖
相反,生长因子可以通过以下 🦋 方式被降解或失活:
蛋白水解酶蛋白水解酶:是一种分解蛋白质的酶。它们可以 🐡 降 🕸 解生长因子,使。其失去 🐼 活性
磷酸酶磷酸酶:是一种去除蛋白质磷酸基团的酶一。些生长因子 🍁 是磷酸化形式的磷酸化,可。以 🐅 。调节它们的活性磷酸酶可以通过去除磷酸基团来失活生长因子
其他降解途径:生长因子还可以通 🦟 过其他降解途径失活,如泛素 🌼 化(ubiquitination)和内吞作用(endocytosis)。
一些生长因子是可以溶解的,例如血管內皮生長因子 (VEGF) 和表皮生長因 🌳 子 (EGF)。它 🌴 ,們在細胞外基質中溶解發揮 🐞 其調節細胞生長、分。化和存活的作用